操作 OCT 包埋劑時(shí)的安全注意事項(xiàng)不可忽視。雖然 OCT 包埋劑本身毒性較低,主要成分聚乙二醇和聚乙烯醇對(duì)人體刺激性小,但在使用過程中仍需避免接觸皮膚和黏膜,若不慎接觸,應(yīng)立即用清水沖洗至少 15 分鐘,防止引起局部刺激;若濺入眼睛,需翻開眼瞼用流動(dòng)清水沖洗,并及時(shí)就醫(yī)。在冷凍操作時(shí),接觸 - 20℃以下的冷臺(tái)和冷凍切片機(jī)部件時(shí),要佩戴耐低溫的防護(hù)手套,防止***;同時(shí)保持實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好,避免因低溫環(huán)境導(dǎo)致室內(nèi)濕度降低引起呼吸道不適,確保實(shí)驗(yàn)操作的安全性。角膜層狀結(jié)構(gòu)經(jīng)OCT包埋后清晰可見。西藏國產(chǎn)OCT包埋劑銷售價(jià)格
OCT 包埋劑在胚胎學(xué)研究中應(yīng)用***。胚胎組織嬌嫩,如小鼠早期胚胎直徑* 0.1-0.2mm,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,傳統(tǒng)包埋方法中的脫水、浸蠟步驟易對(duì)其造成機(jī)械損傷和化學(xué)損傷,而 OCT 包埋能通過低溫快速凝固,輕柔地包裹胚胎組織,在冷凍切片過程中較好地保留胚胎的形態(tài)結(jié)構(gòu),包括各胚層分化、***原基形成等細(xì)節(jié)。研究人員可通過對(duì) OCT 包埋的胚胎切片進(jìn)行免疫組化染色,觀察特定蛋白在胚胎發(fā)育不同階段的表達(dá)分布,便于研究胚胎的發(fā)育過程、組織分化機(jī)制等,為胚胎學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)支持。西藏國產(chǎn)OCT包埋劑銷售價(jià)格視網(wǎng)膜血管結(jié)構(gòu)在OCT包埋切片中清晰。
OCT 包埋劑的用量需要合理控制。包埋時(shí)加入的 OCT 包埋劑過少,可能無法完全包裹組織,導(dǎo)致組織邊緣在切片時(shí)因缺乏支撐而受損,出現(xiàn)破碎或卷邊;用量過多,則會(huì)增加切片的難度,尤其是在切至組織前需要切除大量多余的包埋劑,既浪費(fèi)時(shí)間又浪費(fèi)試劑。一般來說,加入的包埋劑應(yīng)能完全覆蓋組織,并在組織周圍形成 0.5-1cm 厚度的保護(hù)層,對(duì)于直徑 0.5cm 的組織塊,使用 2ml 規(guī)格的包埋模時(shí),加入約 1ml 包埋劑即可;對(duì)于更大的組織塊,可選擇更大規(guī)格的包埋模,具體用量可根據(jù)組織大小和包埋模的規(guī)格靈活調(diào)整,以既能有效保護(hù)組織又不浪費(fèi)試劑為原則。
0. 當(dāng)處理體積較大的組織時(shí),OCT 包埋劑需分多次滴加,每次滴加后稍等片刻讓其與組織初步結(jié)合,避免因一次性加入過多導(dǎo)致包埋劑流淌。待完全覆蓋組織后,可輕輕晃動(dòng)樣本托使包埋劑分布更均勻,冷凍時(shí)也能讓組織各部分受力一致,減少切片時(shí)出現(xiàn)厚薄不均的情況,尤其適合肝臟、腎臟等實(shí)質(zhì)***的大塊組織包埋。對(duì)于直徑超過 1cm 的組織塊,建議在包埋前用鋒利刀片修整邊緣,去除多余脂肪和結(jié)締組織,這樣能讓 OCT 包埋劑更緊密地貼合組織,冷凍后形成的整體結(jié)構(gòu)更穩(wěn)固,切片時(shí)也能減少邊緣碎裂的問題。視網(wǎng)膜變性過程經(jīng)OCT包埋切片可追蹤。
新手使用 OCT 包埋劑時(shí)常出現(xiàn)包埋劑用量不足的問題,導(dǎo)致組織邊緣暴露,切片時(shí)易破碎。建議滴加時(shí)讓包埋劑超出組織邊緣 1-2mm,形成足夠的支撐邊框,同時(shí)避免氣泡產(chǎn)生,若發(fā)現(xiàn)氣泡可用針頭輕輕挑破,保證包埋的完整性。在包埋小組織塊(如小鼠的脾臟、淋巴結(jié))時(shí),可先用少量 OCT 在樣本托上固定組織位置,防止組織在包埋劑凝固前移位,待初步固定后再補(bǔ)充包埋劑覆蓋,這樣能顯著提高小組織包埋的成功率,減少因組織移位導(dǎo)致的切片失敗。眼科組織切片質(zhì)量因OCT包埋而提高。西藏國產(chǎn)OCT包埋劑銷售價(jià)格
視網(wǎng)膜退行性疾病中細(xì)胞凋亡可經(jīng)OCT包埋切片呈現(xiàn)。西藏國產(chǎn)OCT包埋劑銷售價(jià)格
利用 OCT 包埋劑制作的冷凍切片在染色過程中有注意事項(xiàng)。由于 OCT 包埋劑是水溶性的,在進(jìn)行染色前的漂洗步驟時(shí),需將載玻片傾斜 45°,用滴管沿載玻片邊緣緩慢滴加 PBS 緩沖液,讓液體自然流過組織切片,控制好水流速度和時(shí)間,一般漂洗 3 次,每次 3 分鐘,避免水流過大將組織切片沖掉。同時(shí),染色試劑的選擇也很重要,要提前查閱試劑說明書,確保染色試劑不會(huì)與 OCT 包埋劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng),如某些含重金屬的染色劑可能會(huì)與包埋劑成分結(jié)合產(chǎn)生沉淀,影響染色結(jié)果的判讀,染色后要及時(shí)用中性樹膠進(jìn)行封片處理,防止切片干燥褪色。西藏國產(chǎn)OCT包埋劑銷售價(jià)格
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