河北支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-08-18

CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)是生物制藥和生物技術(shù)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要技術(shù),尤其在生產(chǎn)重組蛋白和抗體藥物方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。以下是一些關(guān)于CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)的關(guān)鍵點(diǎn):1.細(xì)胞特性:CHO(ChineseHamsterOvary,中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢)細(xì)胞由于其遺傳背景清晰、內(nèi)源蛋白分泌少,有利于外源蛋白的分離純化,并且可以在優(yōu)化條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。2.服務(wù)內(nèi)容:提供從序列優(yōu)化、載體構(gòu)建、細(xì)胞株構(gòu)建,到細(xì)胞株優(yōu)化及質(zhì)控檢測(cè)的全套服務(wù),包括雙特異性抗體、單抗等CHO細(xì)胞株開發(fā)服務(wù),以及蛋白酶、細(xì)胞因子等的表達(dá)服務(wù)。3.技術(shù)優(yōu)勢(shì):服務(wù)特色包括穩(wěn)定性良好、高產(chǎn)量、高質(zhì)量、快速的篩選高產(chǎn)細(xì)胞株周期(12-16周),以及符合cGMP規(guī)范的合規(guī)性。4.表達(dá)載體構(gòu)建:提供可選表達(dá)載體,如pAZ-V5系列載體(分泌型、可選His-tag),以及其他商業(yè)化載體,配合不同表達(dá)宿主如HEK293系列細(xì)胞和CHO系列細(xì)胞。5.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染小試:進(jìn)行細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和表達(dá)小試,通過(guò)WB(WesternBlot)進(jìn)行表達(dá)分析鑒定。6.表達(dá)及純化:提供擴(kuò)大培養(yǎng)、Ni柱親和純化以及重組蛋白鑒定檢測(cè)等服務(wù),確保蛋白樣品的質(zhì)量。畢赤酵母能夠執(zhí)行翻譯后修飾,如O-和N-糖基化以及二硫鍵形成,這對(duì)于許多蛋白的正確折疊有關(guān)。河北支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)

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Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE):高效、經(jīng)濟(jì)的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù)之一。Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)作為一種高效、經(jīng)濟(jì)的緩沖液原料,因其出色的性能和便捷性,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、乙酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TAE緩沖液具有較低的離子強(qiáng)度,適合分離大分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×的高濃度設(shè)計(jì)使得該粉劑在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。穩(wěn)定性高:粉劑形式的TAE在干燥條件下非常穩(wěn)定,不易受環(huán)境因素影響,適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。使用方法使用Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)時(shí),需按照以下步驟操作:稱量粉劑:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,準(zhǔn)確稱取適量的Tris-乙酸電泳粉劑。北京支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)研發(fā)PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一款專為快速、高保真PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液提供了一種理想的解決方案。

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DNA Marker I:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的精細(xì)“標(biāo)尺”在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker I是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由多條不同長(zhǎng)度的線狀雙鏈DNA片段組成,通常包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp等片段。其中,400 bp或500 bp的條帶通常亮度較高,便于在電泳過(guò)程中快速定位。DNA Marker I是一種即用型產(chǎn)品,已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接取5-10 μL用于電泳,無(wú)需額外處理。其條帶清晰、亮度均勻,即使在低濃度的瓊脂糖凝膠中也能保持良好的分離效果。此外,該產(chǎn)品適用于1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠濃度,推薦使用TAE或TBE緩沖液進(jìn)行電泳。DNA Marker I的主要用途是為DNA片段的大小估算提供參考。通過(guò)與樣品條帶的對(duì)比,研究人員可以快速判斷目標(biāo)DNA片段的大小。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等實(shí)驗(yàn)。在保存方面,DNA Marker I可在室溫下穩(wěn)定保存3個(gè)月,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。其穩(wěn)定性和便捷性使其成為實(shí)驗(yàn)室中理想的常備試劑。

Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE):DNA電泳的高效選擇在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的常用技術(shù),而Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)作為經(jīng)典的緩沖液之一,因其高效、穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。兼容性強(qiáng):TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:5×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過(guò)程中更加穩(wěn)定,只需按照說(shuō)明稀釋即可使用,無(wú)需額外配制。使用方法使用Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)時(shí),需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量的5×TBE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。50×TAE是一種高濃度的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸)。

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在大腸桿菌中表達(dá)VLP(病毒樣顆粒)時(shí),確保蛋白質(zhì)的純度和活性是至關(guān)重要的。以下是一些關(guān)鍵步驟和技術(shù):1.選擇正確的表達(dá)載體:使用能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒載體,并確保含有適當(dāng)?shù)膯?dòng)子和標(biāo)簽(如His標(biāo)簽、GST標(biāo)簽等)以便于后續(xù)的純化和檢測(cè)。2.優(yōu)化培養(yǎng)條件:調(diào)整培養(yǎng)條件,如溫度、pH、誘導(dǎo)劑濃度和培養(yǎng)時(shí)間,以化蛋白的可溶性表達(dá)和活性。3.細(xì)胞裂解:使用溫和的裂解方法,如超聲波或酶裂解,以保持蛋白的活性并減少非特異性的蛋白質(zhì)降解。4.親和層析:利用融合標(biāo)簽(如His標(biāo)簽)進(jìn)行一步或多步親和層析,以高效地從細(xì)胞裂解物中純化目標(biāo)蛋白。5.離子交換層析:通過(guò)離子交換層析進(jìn)一步去除親和層析中未去除的雜質(zhì),提高蛋白的純度。6.分子排阻層析(SEC):使用SEC來(lái)確保產(chǎn)品是均一的蛋白質(zhì),去除多聚體和大分子雜質(zhì)。7.活性檢測(cè):通過(guò)生物化學(xué)或生物物理方法(如ELISA、WB、酶活性測(cè)定、圓二色譜CD等)來(lái)評(píng)估蛋白的活性和構(gòu)象。8.避免蛋白聚集:在表達(dá)和純化過(guò)程中,通過(guò)添加穩(wěn)定劑(如甘油、蔗糖)和使用低溫操作來(lái)防止蛋白聚集。DL3000 DNA Marker憑借其準(zhǔn)確的分子量范圍、清晰的條帶和便捷的操作,成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具。北京九價(jià)HPV病毒樣顆粒表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究

評(píng)估抗體的免疫原性,包括其在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)誘發(fā)的免疫反應(yīng)。這通常涉及對(duì)抗體藥物的抗藥抗體進(jìn)行檢測(cè)。河北支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)

GTBE電泳緩沖液(1×):高效分離DNA片段的科研利器GTBE電泳緩沖液(1×)是一種專為DNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,尤其適用于分離相對(duì)較小的DNA片段(小于2000bp)。其主要成分包括甘氨酸、TBE(Tris-硼酸-EDTA)緩沖液。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)高效分離能力:GTBE緩沖液的緩沖能力較弱,但特別適合分離小于2000bp的DNA片段,能夠提供清晰的電泳條帶。兼容性高:該緩沖液可用于常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳,也可用于脈沖場(chǎng)凝膠電泳,滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。穩(wěn)定性強(qiáng):GTBE電泳緩沖液(1×)在室溫下保存,有效期可達(dá)12個(gè)月,使用方便。使用方法制備凝膠:使用1×GTBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。加樣與電泳:將樣品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用合適的核酸染料(如EB或GoldView)對(duì)凝膠進(jìn)行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。注意事項(xiàng)安全操作:為確保實(shí)驗(yàn)安全,操作時(shí)需佩戴實(shí)驗(yàn)服和一次性手套。保存條件:產(chǎn)品應(yīng)保存于室溫,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫或強(qiáng)光下。使用期限:GTBE電泳緩沖液(1×)的有效期為12個(gè)月,建議在開封后盡快使用。河北支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)