南京JOE熒光定量PCR儀市場報(bào)價(jià)

來源: 發(fā)布時間:2025-08-29

熒光標(biāo)記探針法原理:使用一種特異性的熒光標(biāo)記探針,它能與目標(biāo) DNA 序列雜交。探針的 5' 端標(biāo)記有熒光報(bào)告基團(tuán),3' 端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)。在游離狀態(tài)下,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光會被淬滅基團(tuán)吸收,無法檢測到熒光信號。當(dāng) PCR 反應(yīng)進(jìn)行時,DNA 聚合酶在延伸引物的過程中,會將探針?biāo)?,使?bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,報(bào)告基團(tuán)發(fā)出的熒光信號就可以被儀器檢測到。每擴(kuò)增一條 DNA 鏈,就會有一個探針被水解,釋放出一個熒光信號,熒光信號的強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過程:在 PCR 反應(yīng)的退火階段,熒光標(biāo)記探針會與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性會將探針從 5' 端開始逐個水解,使報(bào)告基團(tuán)游離出來,產(chǎn)生熒光信號。儀器會在每個循環(huán)的延伸階段檢測熒光信號的強(qiáng)度,隨著 PCR 反應(yīng)的進(jìn)行,熒光信號逐漸增強(qiáng),同樣可以得到 Ct 值。定量依據(jù):與熒光染料法類似,通過標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)待測樣本的 Ct 值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出起始模板量。由于熒光標(biāo)記探針具有特異性,能與特定的目標(biāo)序列雜交,因此可以更準(zhǔn)確地對目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析,減少非特異性擴(kuò)增的干擾。與核酸結(jié)合特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好的染料,可減少非特異性信號干擾。南京JOE熒光定量PCR儀市場報(bào)價(jià)

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熒光定量PCR儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面,以下是具體介紹:儀器設(shè)備因素?zé)嵫h(huán)系統(tǒng):熱循環(huán)的準(zhǔn)確性和均勻性至關(guān)重要。如果熱循環(huán)過程中溫度控制不準(zhǔn)確,如實(shí)際溫度與設(shè)定溫度存在偏差,會導(dǎo)致PCR反應(yīng)效率不穩(wěn)定,影響擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量,進(jìn)而使檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。不均勻的溫度分布會使不同反應(yīng)孔之間的擴(kuò)增效果產(chǎn)生差異,增加實(shí)驗(yàn)誤差。熒光檢測系統(tǒng):熒光檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性直接影響結(jié)果。儀器的光學(xué)部件性能不佳,如激發(fā)光源強(qiáng)度不足、熒光信號收集效率低,可能導(dǎo)致弱熒光信號無法被準(zhǔn)確檢測到,影響對低拷貝數(shù)模板的定量分析。此外,熒光檢測通道之間的串?dāng)_也會干擾信號的準(zhǔn)確測量,造成結(jié)果偏差。南京CY3熒光定量PCR儀哪個好在藥物研發(fā)過程中,可用于評估藥物對基因表達(dá)的影響。

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熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:基礎(chǔ)科研基因表達(dá)分析:研究特定基因在不同組織、細(xì)胞以及不同生理狀態(tài)或處理?xiàng)l件下的表達(dá)水平,有助于深入理解基因的功能和調(diào)控機(jī)制?;蚬δ苎芯浚和ㄟ^定量分析基因表達(dá)的變化,探討基因在細(xì)胞增殖、分化、凋亡等過程中的作用,以及基因之間的相互調(diào)控關(guān)系。農(nóng)業(yè)研究:作物遺傳改良:檢測植物基因組中的突變和表達(dá)量變化,評估作物的生長發(fā)育情況和適應(yīng)性,為作物品種選育和遺傳改良提供依據(jù)。植物病蟲害檢測:快速檢測植物病原體,如病毒、細(xì)菌、等,有助于及時采取防治措施,保障農(nóng)作物產(chǎn)量和質(zhì)量。

實(shí)時熒光定量 PCR 儀在多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:作物遺傳育種:在作物遺傳改良中,可用于篩選優(yōu)良基因、鑒定雜種優(yōu)勢以及檢測轉(zhuǎn)基因作物中外源基因的整合和表達(dá)情況。例如,通過檢測與作物抗逆性、產(chǎn)量等相關(guān)基因的表達(dá)水平,篩選出具有優(yōu)良性狀的品種,加快育種進(jìn)程。植物病害檢測:快速檢測植物病原體,如病毒、、細(xì)菌等,及時發(fā)現(xiàn)植物病害,采取相應(yīng)的防治措施,保障農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。例如,檢測果樹中的病毒情況,為果樹的病蟲害防治提供依據(jù)。在一些熒光定量 PCR 儀的相關(guān)介紹中會提及對 TET 染料的支持。

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熒光檢測靈敏度:靈敏度高的儀器能夠檢測到低拷貝數(shù)的核酸模板,對于微量樣本的檢測至關(guān)重要。例如,一些儀器的熒光檢測下限可達(dá)到幾個拷貝數(shù),適合于檢測罕見病原體或低表達(dá)基因。準(zhǔn)確性和重復(fù)性:儀器的熱循環(huán)精度和熒光信號檢測的準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。的儀器熱循環(huán)誤差應(yīng)控制在較小范圍內(nèi),熒光信號檢測的變異系數(shù)(CV)較低,確保每次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性。動態(tài)范圍:寬動態(tài)范圍的儀器能夠準(zhǔn)確檢測不同濃度梯度的樣本,從低拷貝數(shù)到高拷貝數(shù)都能得到準(zhǔn)確的定量結(jié)果,避免因樣本濃度過高或過低而出現(xiàn)檢測誤差。在多重 PCR 反應(yīng)中對不同的目標(biāo)序列進(jìn)行特異性標(biāo)記和檢測。96孔熒光定量PCR儀市場報(bào)價(jià)

結(jié)核分枝桿菌的檢測,傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法需要數(shù)周時間;南京JOE熒光定量PCR儀市場報(bào)價(jià)

核酸測序:在一些測序技術(shù)中,如熒光標(biāo)記的引物測序法,VIC 熒光染料可標(biāo)記在引物或測序反應(yīng)的終止子上。在測序過程中,不同堿基對應(yīng)的熒光標(biāo)記會發(fā)出特定波長的熒光信號,通過檢測這些信號來確定 DNA 序列。VIC 熒光染料的使用有助于提高測序的準(zhǔn)確性和分辨率,尤其在多重測序或高通量測序平臺中,與其他熒光染料配合使用,可實(shí)現(xiàn)對多個樣本或多個基因區(qū)域的同時測序。分子信標(biāo)技術(shù):分子信標(biāo)是一種用于檢測核酸的發(fā)夾狀熒光探針,VIC 熒光染料可標(biāo)記在分子信標(biāo)的莖環(huán)結(jié)構(gòu)上。當(dāng)分子信標(biāo)與目標(biāo)核酸互補(bǔ)結(jié)合時,其莖環(huán)結(jié)構(gòu)打開,熒光染料與淬滅基團(tuán)分離,從而發(fā)出熒光信號。利用 VIC 熒光染料的這種特性,可用于實(shí)時監(jiān)測核酸的雜交過程、基因表達(dá)分析以及核酸分子的體外轉(zhuǎn)錄和翻譯等研究。南京JOE熒光定量PCR儀市場報(bào)價(jià)