生物制品宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學(xué)驗(yàn)證

HEK 293細(xì)胞來源于人胚腎細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域，如病毒載體的生產(chǎn)等。盡管生物制品會經(jīng)過一系列純化工藝以去除相關(guān)雜質(zhì)，但殘留的微量宿主細(xì)胞蛋白（HCP）仍會引發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答，影響產(chǎn)品的質(zhì)量和安全。因此，需要對生產(chǎn)工藝中殘留的HEK 293 HCP進(jìn)行定量檢測，使其符合放行標(biāo)準(zhǔn)。湖州申科生物HEK 293 HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法）適用于HEK 293和HEK 293T來源的生物制品（重組蛋白類、細(xì)胞和基因治療類等）中宿主細(xì)胞蛋白的定量檢測。試劑盒檢測步驟少，快速，專一性強(qiáng)，性能穩(wěn)定可靠。

湖州申科生物憑借其先進(jìn)的整合技術(shù)平臺在HCP檢測領(lǐng)域建立起優(yōu)勢。公司通過自主研發(fā)突破性技術(shù)—包括基于IMBS的抗體覆蓋率檢測方法和基于核酸文庫的低豐度HCP富集技術(shù)，提升了HCP檢測的靈敏度和HCP抗體覆蓋能力，相關(guān)成果已發(fā)表于《中國新藥雜志》《藥物分析雜志》等期刊并納入國家科技重大專項(xiàng)。同時，依托前沿的精密分析平臺，湖州申科構(gòu)建了覆蓋完整HCP分析鏈條的LC-MS解決方案，涵蓋抗原一致性評價、IMBS前處理、低豐度蛋白富集、生信分析及專屬數(shù)據(jù)庫構(gòu)建等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，形成從樣品管理到風(fēng)險分析的閉環(huán)體系。該平臺嚴(yán)格依照法規(guī)要求，所有檢測技術(shù)均通過符合ICH及藥典要求的方法學(xué)驗(yàn)證，確保數(shù)據(jù)可靠并滿足生物制品申報（如IND/BLA）的法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)。憑借這一技術(shù)整合能力，公司已為全球200余家生物醫(yī)藥企業(yè)提供從工藝開發(fā)到質(zhì)控放行的一站式HCP檢測服務(wù)，賦能單抗、疫苗等產(chǎn)品的安全性與合規(guī)性提升。

針對宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測，工藝特異型檢測試劑盒（upstream-process）專為特定生產(chǎn)工藝設(shè)計，其關(guān)鍵在于使用產(chǎn)物的實(shí)際宿主細(xì)胞進(jìn)行開發(fā)與驗(yàn)證，模擬真實(shí)生產(chǎn)流程獲取廣譜HCP抗原，并要求抗血清具備高度覆蓋率以適應(yīng)工藝變動，確保對特定生產(chǎn)流程殘留的高度準(zhǔn)確監(jiān)控。平臺型檢測試劑盒（platform）則由生產(chǎn)商針對其特定表達(dá)宿主細(xì)胞和相近工藝自行開發(fā)，其優(yōu)勢在于可使用相同的參考標(biāo)準(zhǔn)品和試劑統(tǒng)一監(jiān)測在該宿主上生產(chǎn)的不同產(chǎn)品，適用于上游工藝足夠相似的產(chǎn)品線。通用型檢測試劑盒（commercial）則作為市售廣譜方案，適用于相似宿主細(xì)胞的常規(guī)檢測，但因其制備過程可能無法完全模擬目標(biāo)產(chǎn)物的實(shí)際生產(chǎn)，必須嚴(yán)格評估多克隆抗體對特定產(chǎn)品HCP的覆蓋率，以保證檢測可靠性。三類試劑盒覆蓋從深度定制到通用篩查的不同需求。

湖州申科生物建立了專業(yè)化宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測平臺，利用 ELISA 方法分析宿主細(xì)胞蛋白總量，嚴(yán)格把控CV差異和回收率結(jié)果，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)性，開發(fā)的試劑盒或抗體具有靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。在技術(shù)服務(wù)方面，平臺提供兩類關(guān)鍵支撐：一是覆蓋多種宿主（包括CHO、E.coli，酵母等）的殘留HCP檢測服務(wù)，直接輸出蛋白殘留量及樣品回收率數(shù)據(jù)；二是配套的樣品適用性驗(yàn)證體系，通過基質(zhì)定量下限驗(yàn)證、樣品稀釋度驗(yàn)證、準(zhǔn)確性驗(yàn)證及精密度驗(yàn)證（含重復(fù)性與中間精密度）等多維度檢測方案，結(jié)合完整的試劑盒性能報告，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可溯源性，為生物制品工藝雜質(zhì)控制提供可靠保障。

湖州申科生物推出的宿主細(xì)胞殘留蛋白檢測全自動 ELISA 分析系統(tǒng)，整合了標(biāo)曲制備、樣本加樣、恒溫孵育、板孔清洗及結(jié)果檢測等全流程功能。系統(tǒng)搭載的高精度前處理模塊與檢測模塊，通準(zhǔn)確控制實(shí)驗(yàn)參數(shù)，有效減少人為操作誤差，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。其多模塊單獨(dú)運(yùn)行設(shè)計，可實(shí)現(xiàn)不同檢測任務(wù)的并行處理，大幅縮短實(shí)驗(yàn)周期，明顯提升整體實(shí)驗(yàn)效率。在保障結(jié)果可靠的基礎(chǔ)上，該系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了 ELISA 實(shí)驗(yàn)的自動化操作、標(biāo)準(zhǔn)化流程與快速化輸出，降低了對實(shí)驗(yàn)人員的技能要求，同時通過優(yōu)化資源配置減少檢測成本。此外，系統(tǒng)內(nèi)置完善的數(shù)據(jù)管理功能，可滿足實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)完整性記錄與全流程審計追蹤需求，嚴(yán)格符合 21 CFR Part 11 法規(guī)要求，并配備三級權(quán)限管理機(jī)制，進(jìn)一步保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的安全性與規(guī)范性。

大腸埃希氏菌(Escherichia coli，E. coli)又稱大腸桿菌，其作為模式微生物被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究中。隨著基因治療產(chǎn)業(yè)的大力發(fā)展，大腸桿菌也被主要應(yīng)用于質(zhì)粒DNA（pDNA）的生產(chǎn)。由于質(zhì)粒樣品的常見提取工藝中往往使用條件劇烈的堿溶液進(jìn)行細(xì)胞裂解和蛋白質(zhì)變性，使得其中的HCPs與傳統(tǒng)物理破碎法獲得的HCPs有較大的差異，導(dǎo)致其在采用免疫學(xué)原理的檢測方法時，殘留檢測結(jié)果差別較大。湖州申科生物E.coli克隆菌堿裂HCP殘留檢測試劑盒用于大腸桿菌（又名大腸埃希菌）克隆菌株相關(guān)的HCPs檢測，如DH5α、Top10、JM109等。在抗體制備時采用堿裂工藝制備的HCPs免疫動物，獲得專門的抗體。適用于經(jīng)堿液裂解工藝處理后的宿主細(xì)胞蛋白HCPs定量檢測。