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電子探針?lè)治鍪侵敢跃劢沟母咚匐娮觼?lái)激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線(xiàn),對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性或定量分析的一種材料物理試驗(yàn),又稱(chēng)電子探針X射線(xiàn)顯微分析。電子探針?lè)治龅脑硎牵阂詣?dòng)能為10~30千電子伏的細(xì)聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子,使原子電離,此時(shí)外層電子迅速填補(bǔ)空位而釋放能量,從而產(chǎn)生特征X射線(xiàn)。電子探針的功能主要是進(jìn)行微區(qū)成分分析。它是在電子光學(xué)和X射線(xiàn)光譜學(xué)原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種高效率分析儀器。其原理是用細(xì)聚焦電子束入射樣品表面,激發(fā)出樣品元素的特征x射線(xiàn),分析特征X射線(xiàn)的波長(zhǎng)(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(lèi)(定性分析),分析X射線(xiàn)的強(qiáng)度,則可知道樣品中對(duì)應(yīng)元素含量的多少(定量分析)。這種神秘的Wi-Fi探針,實(shí)際是“WiFi信道掃描工具”。金山區(qū)特制探針維修價(jià)格
在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生反義RNA,參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下,要準(zhǔn)確測(cè)定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測(cè)的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理,用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測(cè)定的靶序列互補(bǔ),以檢測(cè)被測(cè)靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。奉賢區(qū)挑選探針生產(chǎn)廠(chǎng)家電子探針是運(yùn)用電子所形成的探測(cè)針(細(xì)電子束)作為X射線(xiàn)的激發(fā)源來(lái)進(jìn)行顯微X射線(xiàn)光譜分析的儀器。
為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相應(yīng)mRNA,這從含有大量mRNA的組織、細(xì)胞中比較容易做到,如從造血細(xì)胞中制備α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,就可以合成與之互補(bǔ)的DNA(即cDNA),cDNA與待測(cè)基因的編碼區(qū)有完全相同的堿基順序,但內(nèi)含子已在加工過(guò)程中切除。寡核苷酸探針是人工合成的,與已知基因DNA互補(bǔ)的,長(zhǎng)度可從十幾到幾十個(gè)核苷酸的片段。如*知蛋白質(zhì)的氨基酸順序量,也可以按氨基酸的密碼推導(dǎo)出核苷酸序列,并用化學(xué)方法合成。
DNA探針(DNA probe)是**常用的核酸探針,為長(zhǎng)度在幾十到幾百甚至上千堿基對(duì)的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團(tuán))進(jìn)行標(biāo)記;在適當(dāng)?shù)膒H值、溫度和離子強(qiáng)度下,DNA探針利用分子的變性、復(fù)性以及堿基互補(bǔ)配對(duì)的高度精確性,能與待測(cè)樣本中互補(bǔ)的非標(biāo)記單鏈DNA或RNA以氫鍵結(jié)合(雜交),形成雙鏈復(fù)合物(雜交體)。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補(bǔ)程度。在嚴(yán)格的條件下(高pH值、高溫、低離子強(qiáng)度),不完全匹配的雜交體的兩鏈將會(huì)解離,而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對(duì)結(jié)合的探針洗去后,可用放射自顯影或酶聯(lián)反應(yīng)等檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)雜交反應(yīng)結(jié)果。電子探針可以對(duì)試樣中微小區(qū)域(微米級(jí))的化學(xué)組成進(jìn)行定性或定量分析。
用此探針在DNA文庫(kù)中篩選,陽(yáng)性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列,而原核則沒(méi)有。因此,真核基因組DNA探針用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針(包括cDNA探針)的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn):①這類(lèi)探針多克隆在質(zhì)粒載體中,可以無(wú)限繁殖,取之不盡,制備方法簡(jiǎn)便。②DNA探針不易降解(相對(duì)RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移,隨機(jī)引物法,PCR標(biāo)記法等,能用于同位素和非同位素標(biāo)記。由分光晶體所分散的單一波長(zhǎng)X射線(xiàn)被X射線(xiàn)檢測(cè)器接受,常用的檢測(cè)器一般是正比計(jì)數(shù)器。金山區(qū)特制探針維修價(jià)格
只要令探測(cè)器連續(xù)進(jìn)行2θ角的掃描,即可在整個(gè)元素范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)連續(xù)測(cè)量。金山區(qū)特制探針維修價(jià)格
電子探針(Electron Probe Microanalysis)是一種利用電子束作用樣品后產(chǎn)生的特征X射線(xiàn)進(jìn)行微區(qū)成分分析的儀器, [1]可以用來(lái)分析薄片中礦物微區(qū)的化學(xué)組成。除H、He、Li、Be等幾個(gè)較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進(jìn)行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經(jīng)過(guò)加速和聚焦的極窄的電子束為探針,激發(fā)試樣中某一微小區(qū)域,使其發(fā)出特征X射線(xiàn),測(cè)定該X射線(xiàn)的波長(zhǎng)和強(qiáng)度,即可對(duì)該微區(qū)的元素作定性或定量分析。電子探針顯微分析原理及其發(fā)展的初期是建立在X射線(xiàn)光譜分析和電子顯微鏡這兩種技術(shù)基礎(chǔ)上的,該儀器實(shí)質(zhì)上就是這兩種儀器的科學(xué)組合。金山區(qū)特制探針維修價(jià)格
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